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以下是關(guān)于小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明：
BS-2216 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。預(yù)先包被sMHC-2捕獲抗體的微孔中依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品和HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體，經(jīng)溫育洗滌后，通過(guò)TMB顯色反應(yīng)測(cè)定吸光度(OD值)，顏色深淺與sMHC-2濃度呈正相關(guān)?。
二、試劑盒組成
微孔酶標(biāo)板?：預(yù)包被抗體(96孔或48孔配置)
標(biāo)準(zhǔn)品?：濃度梯度溶液(通常0.3mL×6管)
檢測(cè)抗體-HRP?：辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記物(10mL/5mL)
洗滌緩沖液?：20×濃縮液需稀釋使用?
顯色液?：底物A/B各3-6mL?
終止液?：酸性溶液(6mL/3mL)?
三、樣本處理
血清?：血液離心1000-3000×g 10分鐘，避免溶血?;
血漿?：EDTA/肝素抗凝，離心后取上清?;
組織勻漿?：按1:9比例加PBS勻漿，3000×g離心10分鐘?;
保存?：分裝凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融?。
四、操作步驟
平衡?：取出板條室溫平衡20分鐘，剩余板條密封4℃保存?;
加樣?：
空白孔：不加樣
標(biāo)準(zhǔn)品孔：50μL不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品
樣本孔：50μL待測(cè)樣本?;
孵育?：加入HRP檢測(cè)抗體100μL，37℃孵育60分鐘?;
洗滌?：用洗滌液洗板5次，拍干?;
顯色?：每孔加底物A/B各50μL，37℃避光反應(yīng)15分鐘?;
終止?：加終止液50μL，15分鐘內(nèi)測(cè)450nm OD值?。
五、注意事項(xiàng)
有效期?：未開(kāi)封試劑盒通常6個(gè)月(2-8℃保存)?;
線性范圍?：需按說(shuō)明書(shū)標(biāo)曲濃度操作，超出范圍可能導(dǎo)致誤差?;
應(yīng)用限制?：僅限科研使用，不可用于臨床診斷?。
如需具體品牌試劑盒的完整說(shuō)明書(shū)，可參考廠商提供的詳細(xì)文檔(如本生BS-2216或天正信達(dá)TZXD-2216?)。
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